Bioquímica e Bioquímica Analítica

Abstrato

Uma peroxidase associada à defesa do limão, com capacidade de descolorar corantes e oferecer resistência ao calor, metais pesados ​​e solventes orgânicos

Veda P Pandey, Prakash K Bhagat, Ramgopal Prajapati, Nivedita Jaiswal, Swati Singh, Manika Awasthi e Upendra N Dwivedi

As peroxidases têm a capacidade de catalisar a reação redox de uma vasta gama de compostos fenólicos e não fenólicos e têm exibido vários papéis fisiológicos no ciclo de vida das plantas. Do ponto de vista das aplicações industriais das peroxidases, o isolamento e caracterização de peroxidases que ofereçam resistência a pH e temperatura mais elevados, sais e solventes orgânicos é altamente desejável. Neste sentido, foi isolado e caracterizado um clone parcial de cDNA da peroxidase de limão. Verificou-se que a peroxidase está associada à defesa, como é evidente pela maior expressão em condições doentes do que em condições saudáveis, tanto a nível de transcrição como de atividade enzimática. Esta peroxidase relacionada com a defesa das folhas de limoeiro foi purificada até à homogeneidade utilizando processos rápidos de duas etapas de tratamento térmico e cromatografia de afinidade . Verificou-se que a peroxidase nativa é um heterotrímero de 200 kDa, constituído por duas subunidades de 66 kDa cada, enquanto uma subunidade de 70 kDa. A peroxidase purificada revelou-se estável ao calor (reteve 92% de atividade a 80°C durante 1 h) e solventes orgânicos, nomeadamente etanol, metanol e isopropanol (reteve 30-50% de atividade na presença de 50% (v/v ) destes solventes durante 1 h). A peroxidase purificada exibiu também tolerância a iões de metais pesados, como o Cd ²⁺ , Ni ²⁺ e Cs ²⁺ . Verificou-se que a peroxidase de limão purificada oxida eficientemente os corantes industriais pela ordem de azul de anilina> laranja de metilo> índigo carmim> azul de tripano> violeta cristal, de modo que se observou 40-54% de descoloração do corante em 4 horas. Assim, as propriedades exibidas pela peroxidase de limão purificada tornam-na uma enzima candidata promissora para a exploração industrial.